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从基础的细胞培养把关细胞质量

细胞培养是所有实验的基础，首先必须要有稳定的培养状况，才能区别、判定差异性，也才能将测试结果实际应用到治疗、制程等应用层面。一般来说，细胞培养所需的基本条件为气体、温度与培养基，前 2 者可由 CO₂培养箱稳定运行，培养基的部分在大多时候是需要由操作者依据不同细胞株，以进行半定制化，其中主要着重于下列几项主要成份：

1. 5-20% 血清

细胞种类多元，一般难以将每种细胞所需的营养进行 100%解析，使用动物血清进行培养，是目前供给细胞营养丰富度的重要来源。血清中提供许多必须营养素(Protein, Lipid etc.)，并且含有许多生长因子和激素(Growth factors, Hormones)，能够帮助细胞贴附、维持培养环境的稳定(pH, Osmolality, surface tension, Viscosity)，更有助于提高生长细胞数、增加存活率、延长继代数，以及使细胞型态与 Cell marker 表现稳定。

2. 基础培养基

随多年的测试与研究发展，大部分已知且可自行制造的营养物配方已经发展成商业化的基础培养基，其中包含各种成分与比例的碳源(Glucose、Sodium Pyruvate)、胺基酸、维生素、无机盐类。并且以不同缓冲效能的 buffer 为基底，其中添加 HEPES 与 Sodium Bicarbonate 中和CO₂ 溶于液体造成的酸性(低 pH 值)及缓冲 pH。

3. 抗生素

细胞由于没有细胞壁，因此对于大部分的抗生素具有抵抗性。刚分离的细胞有潜在污染源或是怕环境、操作造成污染时，可以添加抗生素在培养基中做为预防性措施。一般针对细菌污染常用的是 penicillin/streptomycin 二合一混合液，若是对于真菌/酵母菌可以选用penicillin/streptomycin/amphotericin B 三合一混合液。

此外，细胞的最外围仅有薄薄的细胞膜，因而是敏感且脆弱的，因此在备置细胞培养基或是会直接接触细胞的溶液时，都会特别留意 pH 范围应介于 7.1-7.4、渗透压(Osmolality)介于 310-340mOsm/kg，血红素(Hemoglobin)会造成钾离子浓度上升，改变细胞生理活性，如细胞内外渗透压、电解质平衡、酸硷平衡等，所以建议控制在≦10 mg/dL。其它象是内毒素(Endotoxin)因为会对细胞造成毒性、或可能造成不必要的细胞分化，一般也建议控制在≦10 EU/ml。

冻存流程控制以延续优质细胞

细胞冷冻是细胞培养技术的关键步骤，选择合适的细胞状态、收集细胞、确认细胞质量、到冻存液的选择与冷冻品管理，都会影响细胞的活性及其表现。不当的冷冻和解冻步骤会降低细胞的存活率，更可能改变细胞特性，而使得试验前后无法连贯。