介绍动物细胞的培养过程中所需要的培养器皿和操作器皿
发布时间:2023-11-08 浏览次数:1151
要了解动物细胞培养的器皿,首先要了解动物细胞的培养过程。
1. 动物细胞培养的基本过程
取动物胚胎或幼龄动物器官、组织,将材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用胶原蛋白酶)处理,形成分散的单个细胞,将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,成为细胞贴壁,当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,出现接触抑制。
此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理,再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外,原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。
当细胞从动植物中生长迁移出来,形成生长晕并增大以后,科学家接着进行传代培养,即将原代培养细胞分成若干份,接种到若干份培养基中,使其继续生长、增殖。
2. 动物细胞培养需要的器皿
细胞实验室中主要有3类常见的培养用器皿,即:培养器皿、培养操作有关的器皿、其他用品。
(1)培养器皿:根据材质,分为玻璃培养器皿、塑料培养器皿。其中,前者优点是易于细胞生长,易于清洗,可反复使用。后者优点是价格便宜,为一次性使用。目前,常见的培养器皿有3种,即:培养瓶、培养皿、多孔培养板。
培养瓶:为玻璃或塑料材质,用于培养及繁殖细胞。
将培养瓶置于95%空气与5%CO2混合气体的培养箱中进行培养,必要时可旋转搅拌培养。旋转搅拌培养可以使营养物质得到充分利用且可以使培养液获得充足的氧气以满足细胞代谢的需要。
培养皿:为玻璃或塑料材质,有两大用处,一是用于装取、分离、处理组织,二是用于细胞毒性、单细胞分离、同位素掺入实验。
多孔培养板:为塑料材质,用于各种检测实验,如细胞克隆及细胞毒性实验。
不同颜色的多孔培养板的用途不同,如透明的培养板适用于细胞培养与比色检测、普通光学检测;白色的培养板适用于化学发光法检测,底物显色;黑色的培养板适用于荧光法检测,观察带荧光蛋白标签细胞。所有产品均以伽玛射线灭菌处理。
(2)培养操作有关的器皿
细胞实验室中培养操作有关的器皿主要有3种,即:贮液瓶、吸管、加样器。
贮液瓶:用于存放或配制培养用液体,如培养液、血清及试剂等。
吸管:分为刻度吸管、无刻度吸管。前者用于吸取、转移液体,常用规格为10ml、5ml、2ml、1ml。后者用于吸取、转移液体,吹打、混匀及传代细胞。
移液器:又称“加样器”,用于吸取、移动液体或滴加样本。最好的是微量加样器,吸量准确、方便,可保证实验样品(或试剂)含量精确,重复性良好。
另外,其他用品包括:离心管(收集细胞)、试管(放置试剂)、玻璃容器(存放吸管)、贮槽(存放小件培养物品)、冻存管(冻存细胞),以及各种注射器、烧杯、量筒、漏斗、酒精灯。
文章来源:“学甫无境”公众号,作者~王甫荣。
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