工程院食品安全院士团队

科研成果转化平台

培养基是微生物检验中常用的一种实验室试剂，主要用于提供微生物生长所需的营养、能量、生长因子等物质和适宜的生长环境。常见的培养基种类很多，根据不同的需求可以选择不同类型的培养基。

具体来说，培养基在微生物检验中的作用包括：
   1. 提供营养物质：培养基中含有细菌或真菌所需的碳源、氮源、磷源、微量元素、维生素等营养物质，能够满足微生物的生长和繁殖需要。
   2. 提供生长因子：某些微生物需要特殊的生长因子才能生长，如某些细菌需要血红蛋白、NAD等，培养基可以添加这些生长因子以促进微生物的生长。
   3. 维持适宜的生理状态：培养基可以调节pH值、温度、氧气浓度、盐度等因素，使微生物处于适宜的生理状态，促进其生长和繁殖。
   4. 检测微生物数量：通过培养基上的特定反应，如酶底物法、品红亚硫酸钠法等，可以检测微生物的数量和质量。

总之，培养基是微生物检验中必不可少的一种实验室试剂，能够提供微生物所需的营养和环境，促进其生长和繁殖，从而为微生物检验提供了必要的条件。在新版的 GBT 5750.12-2023《生活饮用水标准检验方法 第12部分：微生物指标》中提供了三种总大肠菌群的检验方法，其培养基的成分作用如下：

一、多管发酵法

1.1 乳糖蛋白胨培养液成分及其作用如下：
   a) 蛋白胨：提供细菌所需的氮源和碳源，促进细菌的生长。
   b) 牛肉膏：提供多种氨基酸和营养物质，促进细菌的生长。
   c) 乳糖：为大肠杆菌等肠道细菌提供碳源，促进它们的代谢。
   d) 氯化钠：调节培养基的渗透压，保证培养基中的离子平衡。
   e) 溴甲酚紫乙醇溶液(16 g/L)：是一种指示剂，将在发酵过程中变色，用于判断菌落形成和数量。
   f) 纯水：作为培养基的溶剂，保证培养基的均匀性和稳定性。

这些成分共同作用，能够提供合适的营养和环境条件，促进水中总大肠菌群的生长和繁殖，并且通过溴甲酚紫乙醇溶液的变色反应，可以判断菌落形成和数量。

1.2 伊红美蓝培养基各成分的作用如下：
   a) 蛋白胨：为细菌提供氮源和碳源，促进细菌的生长。
   b) 乳糖：为大肠杆菌等肠道细菌提供碳源，促进它们的代谢。
   c) 磷酸氢二钾：调节培养基的pH值，使其维持在适宜的范围内。
   d) 琼脂：作为凝胶剂，使得培养基能够固化。
   e) 纯水：作为培养基的溶剂，保证培养基的均匀性和稳定性。
   f) 伊红水溶液(20.0 g/L)：是一种指示剂，将在发酵过程中变色，用于判断菌落形成和数量。
   g) 美蓝水溶液(5.0 g/L)：也是一种指示剂，将在发酵过程中变色，用于判断菌落形成和数量。

这些成分共同作用，能够提供合适的营养和环境条件，促进水中总大肠菌群的生长和繁殖，并且通过伊红美蓝指示剂的变色反应，可以判断菌落形成和数量。

二、滤膜法

2.1 品红亚硫酸钠培养基各成分的作用如下：
   a) 蛋白胨：为细菌提供氮源和碳源，促进细菌的生长。
   b) 酵母浸膏：提供多种维生素和微量元素，促进细菌的生长。
   c) 牛肉膏：为细菌提供营养和生长因子，促进细菌的生长。
   d) 乳糖：为细菌提供碳源和能量，促进细菌的生长。
   e) 琼脂：作为培养基的凝胶剂，使培养基凝固。
   f) 磷酸氢二钾：调节培养基的pH值，使其维持在适宜的范围内。
   g) 无水亚硫酸钠：具有抗氧化作用，保护培养基中的细菌不被氧化破坏。
   h) 碱性品红乙醇 [φ (C₂H₅OH)=95 %]溶液（50.0 g/L）：是一种指示剂，能够区分产酸和产气的细菌，使其呈现红色或粉红色。
   i) 纯水：作为培养基的溶剂，保证培养基的均匀性和稳定性。

这些成分共同作用，能够提供合适的营养和环境条件，促进水中总大肠菌群的生长和繁殖。通过品红亚硫酸钠培养基的特殊配方，能够区分产酸和产气的细菌，并且使其呈现红色或粉红色，从而进行总大肠菌群的检测。

三、酶底物法

3.1、MMO-MUG培养基各成分的作用如下：
   a) 硫酸铵：提供氮源，促进细菌的生长。
   b) 无水硫酸锰：作为酶的辅因子，促进酶在催化反应过程中的活性。
   c) 无水硫酸锌：作为酶的辅因子，促进酶在催化反应过程中的活性。
   d) 无水硫酸镁：提供镁离子，促进酶的活性。
   e) 氯化钠：调节培养基的渗透压，保证细胞内外的离子平衡。
   f) 氯化钙：提供钙离子，促进细菌的生长。
   g) 亚硫酸钠：具有抗氧化作用，保护培养基中的酶不被氧化破坏。
   h) 两性霉素 B（Amphotericin B）：是一种抗真菌药物，用于防止培养基中的真菌污染。
   i) 邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷（ONPG）：是一种酶底物，在酶的作用下会被分解，产生黄色产物，用于检测细菌的数量。
   j) 4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷（MUG）：也是一种酶底物，在酶的作用下会被分解，产生蓝色产物，用于检测细菌的数量。
   k) 茄属植物萃取物（Solanium 萃取物）：为细菌提供营养和生长因子，促进细菌的生长。
   l) N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸钠盐（HEPES 钠盐）：调节培养基的pH值，使其维持在适宜的范围内。
   m) N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸（HEPES）：同样用于调节培养基的pH值。
   n) 纯水：作为培养基的溶剂，保证培养基的均匀性和稳定性。

这些成分共同作用，能够提供合适的营养和环境条件，促进水中总大肠菌群的生长和繁殖，并且通过ONPG和MUG酶底物的分解反应，能够产生黄色或蓝色产物，用于检测细菌的数量。

原标题：“方法解读1：水中总大肠菌群检验方法中的培养基”

来源：环凯转载于“辽宁水协”公众号，内容版权归原作者所有。
说明：文章、视频、图片等所有内容，仅用于学习交流，若有侵权内容及其他涉法内容，请及时联系删除或修改，特此声明！