培养基倾倒方法及步骤
发布时间：2024-11-01 浏览次数：124
1、温度调节。培养基倾注的适宜温度大约为45℃。如果温度过高，会导致凝固时间延长，且皿盖上会有大量冷凝水，不利于后续实验。如果温度过低，则可能导致倒板过程中瓶中培养基部分凝固。
2、添加成分。如果培养基需要加入添加成分，这些成分在加入前应先放置到室温，以避免冷的液体造成琼脂凝结或形成片状物。
3、静置时间。培养基灭菌后应放置在水浴或烘箱中，使用前拿出直接倒板。培养基的静置时间不宜过长，一般不超过4小时，以避免琼脂少量凝固。
4、平板准备。倒皿前，平皿应保持在35℃~40℃的温度。如果需要表面接种，有冷凝水的平板表面容易产生蔓延菌落。这时可放在有对流的无菌净化台中吹干培养基表面，但不能过度干燥，否则培养过程中平板容易开裂。
5、倾注量。平板倾注量一般在18~20mL左右，如果培养时间超过48小时或培养温度高于40℃，为防止水分过量蒸发导致平板开裂，倾注量一般为25mL左右。
6、避免气泡。倒平板时尽量贴着平皿壁缓慢倒入，将气泡留在瓶子底部。如果平板中有少量气泡的话，可以把气泡轻摇到平板壁上，这样不会影响结果观察。
7、混合均匀。每个平板中加入10mL融化的琼脂培养基并迅速往复摇动和转圈晃动5~15次使培养基与接种物充分混合。
8、培养。待平板冷却后翻转并置于适当的温度下培养。
在整个操作过程中，需要注意避免污染，使用前需将装有培养基的瓶子或试管弄松，然后放在滚水或蒸汽浴里进行溶解，要小心避免培养基过热变质。已消毒培养皿的数量要比所测样品的数量多一个做空白对照。
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